Usługa sukcesywnego sekwencjonowania próbek metodą NGS na platformie Illumina, obejmująca maksymalnie 100 próbek ludzkiego DNA (WGS, pokrycie 30x, dane min. 120 Gbp/próbkę). Wykonawca zapewnia transport materiału i wyników, analizę bioinformatyczną oraz bezpieczeństwo danych wg RODO (przetwarzanie tylko na terenie EOG lub państw uznanych przez KE). Wymagane: raporty QC, formaty FASTQ/VCF/BAM, niszczenie materiału i danych po 2 miesiącach od przekazania wyników. Termin realizacji: 12 miesięcy.
Trudność: wysoka
Złożoność techniczna (sekwencjonowanie genomowe, analiza bioinformatyczna), rygorystyczne wymogi bezpieczeństwa danych medycznych oraz konieczność koordynacji logistyki i zgodności prawnej.
Wyodrębnione z wyjaśnień treści SWZ.
1Termin płatności (§ 4, ust. 6 i ust.10) jest wskazany na 30 dni. U Wykonawcy zwyczajowo stosujemy termin 14 dni. Prosimy o zmianę.Zamawiający nie wyraża zgody na zmianę.
1Czy wymóg 120 Gbp/próbkę dotyczy danych surowych, czy mapowalnych? Prosimy również o doprecyzowanie, jak ten wymóg należy rozumieć względem zapisu o pokryciu mapowalnym ≥30×. Pomoże nam to prawidłowo dobrać konfigurację sekwencjonowania.Zamawiający wskazuje, że wymaganie 120 Gbp/próbkę odnosi się do danych surowych (FASTQ), natomiast wskazane pokrycie mapowalne ≥30× dotyczy średniego pokrycia po wyrównaniu do referencji.
1Czy wymóg 120 Gbp/próbkę dotyczy danych surowych, czy mapowalnych? Prosimy również o doprecyzowanie, jak ten wymóg należy rozumieć względem zapisu o pokryciu mapowalnym ≥30×. Pomoże nam to prawidłowo dobrać konfigurację sekwencjonowania.Zamawiający wskazuje, że wymaganie 120 Gbp/próbkę odnosi się do danych surowych (FASTQ), natomiast wskazane pokrycie mapowalne ≥30× dotyczy średniego pokrycia po wyrównaniu do referencji.
1Prosimy o potwierdzenie, że prof. dr. hab. Jacka Bigdę – p.o. Kanclerza jest uprawniony do
reprezentacji Gdańskiego Uniwersytetu Medycznego. Nie wynika to ze statutu uczelni, a do projektu
umowy nie zostało dołączone pełnomocnictwo. W przypadku zawarcia umowy, powinniśmy poprosić
o dołączenie pełnomocnictwa lub chociaż udostępnienie informacji o takim pełnomocnictwie.Zamawiający dołączy pełnomocnictwo do umowy na etapie jej podpisywania, jeżeli Wykonawca będzie
tego wymagał.
1Szanowni Państwo,
dzia³aj±c jako podmiot zainteresowany ubieganiem siê o udzielenie powy¿szego zamówienia
(potencjalny Wykonawca), na podstawie sekcji VIII pkt 2 Og³oszenia, zwracamy siê z uprzejm± pro¶b±
o wyja¶nienie i rozważenie zmiany tre¶ci Og³oszenia oraz Opisu Przedmiotu Zamówienia w zakresie
wymogu wykonania sekwencjonowania wy³±cznie na platformie Illumina, metod± sekwencjonowania
przez syntezê (SBS), z u¿yciem oryginalnych produktów Illumina TruSeq DNA (Opis Przedmiotu
Zamówienia, sekcja 1 ppkt h oraz zdanie wprowadzaj±ce).
Mamy ¶wiadomo¶æ, ¿e postêpowanie prowadzone jest w trybie art. 70 Kodeksu cywilnego w zwi±zku
z art. 11 ust. 5 pkt 1 ustawy Prawo zamówieñ publicznych, co pozostawia Zamawiaj±cemu szerok±
swobodê w kszta³towaniu warunków. Tym bardziej, w duchu wspó³pracy oraz d±¿enia do najwy¿szej
jako¶ci naukowej projektu i efektywnego wydatkowania ¶rodków publicznych, uprzejmie prosimy o
rozwa¿enie poni¿szych punktów.
1. Cel porównywalno¶ci jest osi±gany przez potok analityczny, a nie przez markê sekwenatora
Zamawiaj±cy uzasadnia wymóg potrzeb± zachowania ci±g³o¶ci metodyki oraz porównywalno¶ci
wyników z wcze¶niejszymi analizami. Pragniemy zwróciæ uwagê, ¿e w ¶wietle wskazanej przez samego
Zamawiaj±cego pracy referencyjnej (Supernat i wsp. 2018) porównywalno¶æ wyników
sekwencjonowania ca³ogenomowego jest determinowana przez potok analityczny i genom
referencyjny, a nie przez chemiê sekwencjonowania. Praca ta porównuje narzêdzia wywo³ywania
wariantów (DeepVariant, GATK, SpeedSeq) na próbce referencyjnej NA12878 i wykazuje, ¿e przy
pokryciu 30× wszystkie osi±gaj± zbli¿ony wspó³czynnik F dla wariantów SNV na poziomie 0,98. Opis
Przedmiotu Zamówienia ju¿ dzi¶ jednoznacznie definiuje ten potok (mapowanie do GRCh38,
DeepVariant i DeepTrio, ClinSV, adnotacja ENSEMBL VEP). Ci±g³o¶æ metodyki i porównywalno¶æ
pozostaj± zatem w pe³ni zachowane niezale¿nie od platformy sekwencjonowania, o ile spe³nione s±
okre¶lone w OPZ progi jako¶ci oraz zastosowany jest ten sam potok. Co istotne dla wymaganej
ci±g³o¶ci, porównywalno¶æ z wcze¶niejszymi danymi zapewnia stosowanie tego samego genomu
referencyjnego, tego samego potoku i tych samych progów akceptacji, a bezpo¶rednie porównanie
obu chemii na tych samych próbkach referencyjnych (Carroll i wsp. 2025) nie wykazuje istotnego
efektu platformowego.
2. Platformy równowa¿ne daj± jako¶æ co najmniej równ±, a w kluczowych parametrach wy¿sz±
Dostêpne dzi¶ równowa¿ne platformy sekwencjonowania krótkich odczytów oparte na chemii
awidno¶ciowej (avidity sequencing) pozwalaj± osi±gn±æ jako¶æ danych co najmniej równ±, a w
istotnych parametrach przewy¿szaj±c± warto¶ci uzyskiwane metod± SBS, przy pe³nej zgodno¶ci ze
struktur± odczytów wymagan± w OPZ. Wskazujemy konkretne, recenzowane dane:
1. Dok³adno¶æ zasad: oko³o 96% danych o jako¶ci co najmniej Q30 oraz oko³o 85% o jako¶ci co
najmniej Q40 (maksymalnie ok. Q44, czyli ok. jednego b³êdu na 25 000 zasad) na genomie cz³owieka.
Z nawi±zk± spe³nia to próg „90%…Po analizie przedstawionego wniosku Zamawiaj±cy nie wyra¿a zgody na proponowan± zmianê Opisu
Przedmiotu Zamówienia i podtrzymuje wymóg wykonania us³ugi z wykorzystaniem wskazanych
technologii. Wymóg ten wynika z konieczno¶ci zachowania spójno¶ci metodologicznej i
porównywalno¶ci danych z wynikami uzyskanymi wcze¶niej w ramach projektu, w którym Zamawiaj±cy
przeanalizowa³ ju¿ znacz±ce liczby próbek. Zamawiaj±cy ma na celu ograniczenie ryzyka naukowego
zwi±zanego z integracj± danych z ró¿nych platform oraz konieczno¶æ tworzenia nowych algorytmów
obliczeniowych, filtrów i modeli dla nowego rodzaju danych. Wymagana technologia stanowi element
przyjêtej metodologii badawczej, zapewniaj±cej jednorodno¶æ procesu wytwarzania danych i
eliminuj±cej ryzyko efektów platformowych wp³ywaj±cych na wyniki analiz. W zwi±zku z powy¿szym
Zamawiaj±cy pozostawia tre¶æ Og³oszenia, OPZ oraz pozosta³ych dokumentów bez zmian.
2Jakie są minimalne wymagania dla materiału wejściowego gDNA: ilość, stężenie, A260/280, A260/230, DIN? Te parametry są dla nas istotne przy doborze odpowiedniego wariantu przygotowania bibliotek.Minimalne wymagania dla materiału wejściowego gDNA to: ilość gDNA co najmniej 1 ug w co najmniej 20 μl z A260/A280 ≥1.7, A260/230 ≥1.8 oraz DIN co najmniej 7.0.
2Podstawa wystawienia faktury: warto wskazać dokładnie sposób rozliczania pracy. Jeśli planujemy 2
partie próbek do badania, to: "Faktura będzie wystawiona po odbiorze wyników każdej z nich, na
podstawie protokołu odbioru, w którym znajdzie się informacja o ilości próbek oraz wycenie pracy za
daną partię oraz o kwocie do wykorzystania na dalsze badania". Wówczas nie będzie miał zastosowania
zapis z (§ 4, ust 11), w którym jest mowa o "przedwczesnym wystawieniu faktury". Proces fakturowania
wymaga ustalenia momentu powstania przychodu, a co za tym idzie wystawienia faktury. Momentem
tym będzie data podpisania protokołu odbioru.Sposób rozliczenia pracy jest wskazany w § 4 ust. 4 projektu umowy. Zapis o „przedwczesnym
wystawieniu faktury” wskazany w § 4 ust. 11 projektu umowy jest standardowym zapisem w umowach
GUMed. Jeżeli nie zostaną spełnione przesłanki tam wskazane to nie zostanie on zastosowany.
Zamawiający nie wymaga sporządzenia protokołu odbioru.
2Jakie są minimalne wymagania dla materiału wejściowego gDNA: ilość, stężenie, A260/280, A260/230, DIN? Te parametry są dla nas istotne przy doborze odpowiedniego wariantu przygotowania bibliotek.Minimalne wymagania dla gDNA to: ilość ≥200 ng, stężenie ≥20 ng/μl, A260/280 w zakresie 1.8–2.0, A260/230 ≥1.8 oraz DIN ≥7 lub DNA o porównywalnie wysokiej integralności.
3Czy przez zapis „TruSeq DNA” Zamawiający rozumie konkretnie TruSeq DNA PCR-Free, czy dopuszcza Illumina DNA PCR-Free Prep jako rozwiązanie równoważne, nowszej generacji? Producent wskazuje na porównywalną jakość przy zachowaniu metodyki PCR-free.Przez „TruSeq DNA” Zamawiający dopuszcza również równoważne rozwiązania PCR-free (np. nowsze zestawy Illumina).
3Czy przez zapis „TruSeq DNA” Zamawiający rozumie konkretnie TruSeq DNA PCR-Free, czy dopuszcza Illumina DNA PCR-Free Prep jako rozwiązanie równoważne, nowszej generacji? Producent wskazuje na porównywalną jakość przy zachowaniu metodyki PCR-free.Przez „TruSeq DNA” Zamawiający dopuszcza również równoważne rozwiązania PCR-free (np. nowsze zestawy Illumina).
4Prosimy o potwierdzenie numeru postępowania/umowy — w dokumentacji pojawia się drobna rozbieżność: OPZ wskazuje GUM2026ZP0073, natomiast §7 umowy powierzenia przetwarzania danych wskazuje GUM2026UP0452.Numer zapytania to GUM2026ZP0073, umowa będzie miała odrębny numer nadany w Centralnym Rejestrze Umów Zamawiającego (obecnie wzór umowy procedowany był pod numerem GUM2026UP0452).
4Prosimy o potwierdzenie numeru postępowania/umowy — w dokumentacji pojawia się drobna rozbieżność: OPZ wskazuje GUM2026ZP0073, natomiast §7 umowy powierzenia przetwarzania danych wskazuje GUM2026UP0452.Numer zapytania to GUM2026ZP0073, umowa będzie miała odrębny numer nadany w Centralnym Rejestrze Umów Zamawiającego (obecnie wzór umowy procedowany był pod numerem GUM2026UP0452).
5Dotyczy progu jakości Q30: w OPZ wskazano poziom ≥90% zasad Q30. Formalna specyfikacja producenta dla platformy Illumina przy odczytach 2×150 bp wynosi ≥85% zasad ≥Q30 (przy czym w praktyce, z chemią XLEAP-SBS, wartości te rutynowo przekraczają 90%). Prosimy o doprecyzowanie: czy próg ≥90% Q30 jest twardym kryterium akceptacji, czy odnosi się do danych całego runu (kontrola PhiX) czy do danych konkretnej próbki, oraz czy liczony jest na danych surowych, czy po przycięciu/filtrowaniu jakościowym? Pomoże nam to właściwie zaplanować parametry sekwencjonowania. (oraz pytanie 6: Dotyczy zakresu analizy: Zwracamy się z prośbą d Zamawiającego czy dopuszcza zastosowanie — zestawu opartego na technologii sekwencjonowania proksymalnego (proximity ligation), uzupełniającego standardowy shortread WGS? [..])Zamawiający dopuszcza wyłącznie technologię short-read WGS zgodną z wymaganiami OPZ, zapewniającą uzyskanie danych referencyjnej jakości (≥30× pokrycia mapowalnego) dla analizy wariantów germinalnych. Technologie oparte na proximity ligation lub inne metody uzupełniające (np. Hi-C lub podobne) mogą być stosowane wyłącznie pomocniczo, o ile nie wpływają na podstawowy zakres danych WGS ani nie zastępują sekwencjonowania short-read. Wszelkie rozwiązania alternatywne muszą gwarantować pełną porównywalność danych do standardowego WGS oraz spełnienie wszystkich parametrów jakościowych OPZ.
5Dotyczy progu jakości Q30: w OPZ wskazano poziom ≥90% zasad Q30. Formalna specyfikacja producenta dla platformy Illumina przy odczytach 2×150 bp wynosi ≥85% zasad ≥Q30 (przy czym w praktyce, z chemią XLEAP-SBS, wartości te rutynowo przekraczają 90%). Prosimy o doprecyzowanie: czy próg ≥90% Q30 jest twardym kryterium akceptacji, czy odnosi się do danych całego runu (kontrola PhiX) czy do danych konkretnej próbki, oraz czy liczony jest na danych surowych, czy po przycięciu/filtrowaniu jakościowym? Pomoże nam to właściwie zaplanować parametry sekwencjonowania.Próg ≥90% zasad o jakości Q30 stanowi wymaganie jakościowe dla danych dostarczonych dla każdej próbki i jest oceniany na danych surowych (FASTQ), przed przycięciem i filtrowaniem jakościowym. Zamawiający oczekuje spełnienia tego parametru dla wyników przekazywanych w ramach realizacji zamówienia.